pcr样本加样正确方法,你知道吗


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1、PCR作流程:1. 从冰箱取出所需试剂、样品,放置在冰盒上,解冻试剂、样品,点动离心。

2、 2. 取所需数量小EP管(200 μl),按附录所示配制反应体系。

3、 3. 加完所有试剂和样品后,点动离心,去除管内气泡。

4、 4. 在PCR仪上设定合适参数,具体见仪器作手册。

5、参数设置完成后,将反应管放入PCR仪内小EP管位,根据所用EP管调整热盖位置,盖紧上盖。

6、 5. 启动程序,做好记录。

7、 6. 完成后及时取出反应管,关闭仪器。

8、 7. 用0.5×TBE配制琼脂糖胶,100 V,电泳15-25 min,紫外灯下观察条带,必要时拍照记录。

9、 注意事项: 1. 节约试剂,所有试剂使用前都应点动离心;若为探索条件或鉴定试验,25 μl反应体系。

10、 2. 含酶试剂应尽量保持低温,从冰箱取出解冻后,应尽量放在冰盒里,每次吸完后也应放回冰盒。

11、 3. 加试剂及样品应按顺序进行,模板应在后加入;自加引物开始,每次吸样前都必须更换吸头。

12、 4. 注意移液器正确使用,吸取或排出微量液体时,应注意保证吸取或加入量的准确性。

13、 5. 加完所有试剂后去气泡应。

14、 6. 及时记录仪器使用及状况。

15、 7. 琼脂糖胶浓度可根据目的条带大小做适当调整。

本文到这结束,希望上面文章对大家有所帮助。

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