色谱法测什么物质?
色谱法可以测定各种有机化合物、无机化合物、生物大分子等物质,如脂肪酸、氨基酸、核苷酸、多糖、激素、物、农、环境污染物等。不同的色谱法适用于不同类型的物质分析,如气相色谱法适用于挥发性和半挥发性有机化合物的分析,液相色谱法适用于极性和非极性化合物的分析等。
色谱法分析什么 色谱分析法的分析原理
色谱法分析什么 色谱分析法的分析原理
色谱法分析什么 色谱分析法的分析原理
有机化合物
一种利用混合物中诸组分在两相间的分配原理以获得分离的方法。
色谱法(chromatography)又称“色谱分析”、“色谱分析法”、“层析法”,是一种分离和分析方法,在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。
色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配,以固定相对流动相中进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,最终达到分离的效果。色谱法起源于20世纪初,1950年代之后飞速发展,并发展出一个的学科-色谱学。历史上曾经先后有两位化学家因为在色谱领域的突出贡献而获得诺贝尔化学奖,此外色谱分析方法还在12项获得诺贝尔化学奖的研究工作中起到关键作用。
气相色谱被很多行业使用,主要其分析速度快,能检测绝大部分低分子物质。加上检测器的广泛性,用来定性定量分析。如果你只是想知道气相色谱适用测定什么样的样品,那么简单而全面的告诉你:只要在气相色谱仪允许的条件下可以气化而不分解的物质,都可以用气相色谱法测定。对部分热不稳定物质,或难以气化的物质,通过化学衍生化的方法,仍可用气相色谱法分析(比如顶空气相色谱法)。
可以测化学化合物,一般都可以测
色谱法的优势与不足?
优点:分离效率高,选择性好,检测灵敏度高,作自动化,应用范围广; 与气相色谱法相比具有的优点:不受试样的挥发性和热稳定性限制,应用范围广;流动相种类多,可通过流动相的优化达到高的分离效率;一般在啊室温下分析即可,不需高柱温。
缺点:分析成本高,液相色谱仪价格及日常维护费用贵,分析时间一般比气相长。
色谱分析法的原理是什么?
色谱法(chromatography)又称色谱分析、色谱分析法、层析法,是一种分离和分析方法,在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,最终达到分离的效果。 色谱法基本原理是指在填充色谱柱中,当组分随流动相向柱出口迁移时,流动相由于受到固定相颗粒障碍,不断改变流动方向,使组分分子在前进中形成紊乱的类似涡流的流动,故称涡流扩散。 1.涡流扩散项 A 在填充色谱柱中,当组分随流动相向柱出口迁移时,流动相由于受到固定相颗粒障碍,不断改变流动方向,使组分分子在前进中形成紊乱的类似涡流的流动,故称涡流扩散。 由于填充物颗粒大小的不同及填充物的不均匀性,使组分在色谱 柱中路径长短不一,因而同时进色谱柱的相同组分到达柱口时间并 不一致,引起了色谱峰的变宽。色谱峰变宽的程度由下式决定: A = 2λdp 上式表明,A与填充物的平均直径dp的大小和填充不规则因子λ有关,与流动相的性质、线速度和组分性质无关。为了减少涡流扩散,提高柱效,使用细而均匀的颗粒,并且填充均匀是十分必要的。对于空心毛细管,不存在涡流扩散。因此 A = 0。 2. 分子扩散项 B / u (纵向扩散项) 纵向分子扩散是由浓度梯度造成的。组分从柱入口加入,其浓度分布的构型呈“塞子”状。它随着流动相向前推进,由于存在浓度梯度,“塞子”必然自发的向前和向后扩散,造成谱带展宽。分子扩散项系数为 B = 2γ Dg γ是填充柱内流动相扩散路径弯曲的因素,也称弯曲因子,它反映了固定相颗粒的几何形状对自由分子扩散的阻碍情况。 Dg为组分在流动相中扩散系数(cm3·s-1),分子扩散项与组分在流动相中扩散系数Dg成正比. Dg与流动相及组分性质有关: (a) 相对分子质量大的组分Dg小,Dg反比于流动相相对分子质量的平方根,所以采用相对分子质量较大的流动相,可使B项降低; (b) Dg随柱温增高而增加,但反比于柱压。 另外纵向扩散与组分在色谱柱内停留时间有关,流动相流速小,组分停留时间长,纵向扩散就大。因此为降低纵向扩散影响,要加大流动相速度。对于液相色谱,组分在流动相中纵向扩散可以忽略。 3. 传质阻力项 Cu 由于气相色谱以气体为流动相,液相色谱以液体为流动相,它们的传质过程不完全相同。 (1)气液色谱 传质阻力系数C包括气相传质阻力系数Cg和液相传质阻力系数C1两项,即 C = Cg+ C1 气相传质过程是指试样组分从气相移动到固定相表面的过程。这一过程中试样组分将在两相间进行质量交换,即进行浓度分配。有的分子还来不及进入两相界面, 就被气相带走;有的则进入两相界面又来不及返回气相。这样使得试样在两相界面上不能瞬间达到分配平衡,引起滞后现象,从而使色谱峰变宽。对于填充柱,气相传质阻力系数Cg为: Cg= 0.01k2 / (1 + k)2 · dp / Dg 式中k为容量因子。由上式看出,气相传质阻力与填充物粒度dp的平方成正比,与组分在载气流中的扩散系数Dg成反比。因此,采用粒度小的填充物和相对分子质量小的气体(如氢气)做载气,可使Cg减小,提高柱效。 液相传质过程是指试样组分从固定相的气/液界面移动到液相内部,并发生质量交换,达到分配平衡,然后又返回气/液界面的传质过程。这个过程也需要一定的时间,此时,气相中组分的其它分子仍随载气不断向柱口运动,于是造成峰形扩张。液相传质阻力系数 C1为: C1 = 2 / 3 · k / (1 + k)2 · df2 / Dl 由上式看出,固定相的液膜厚度df薄,组分在液相的扩散系数D1大,则液相传质阻力就小。降低固定液的含量,可以降低液膜厚度,但k值随之变小,又会使C1增大。当固定液含量一定时,液膜厚度随载体的比表面积增加而降低,因此,一般采用比表面积较大的载体来降低液膜厚度。但比表面太大,由于吸附造成拖尾峰,也不利于分离。虽然提高柱温可增大D1,但会使k值减小,为了保持适当的C1值,应控制适宜的柱温。 (2) 液液分配色谱 传质阻力系数(C)包含流动相传质阻力系数(Cm)和固定相传质阻力系数(Cs),即 C = Cm + Cs 其中Cm又包含流动的流动相中的传质阻力和滞留的流动相中的传质阻力,即: Cm = wmdp2 / Dm + wdp2 / Dm 式中右边项为流动的流动相中的传质阻力。当流动相流过色谱柱内的填充物时,靠近填充物颗粒的流动相流速比在流路中间的稍慢一些,故柱内流动相的流速是不均匀的。 这种传质阻力对板高的影响与固定相粒度dp 的平方成正比,与试样分子在流动相中的扩散系数Dm成反比,ωm是由柱和填充的性质决定的因子。 右边第二项为滞留的流动相中的传质阻力。这是由于固定相的多孔性,会造成某部分流动相滞留在一个局部,滞留在固定相微孔内的流动相一般是停滞不动的流动相中的试样分子要与固定相进行质量交换,必须首先扩散到滞留区。如果固定相的微孔既小又深,传质速率就慢,对峰的扩展影响就大(如教材P.302图15.6所示)。式中ωm是一常数,它与颗粒微孔中被流动相所占据部分的分数及容量因子有关。显然,固定相的粒度愈小,微孔孔径愈大,传质速率就愈快,柱效就高。对高效液相色谱固定相的设计就是基于这一考虑。 液液色谱中固定相传质阻力系数(Cs)可用下式表示: Cs= wsdf2 / Ds 公式说明试样分子从流动相进入固定液内进行质量交换的传质过程与液膜厚度df平方成正比,与试样分子在固定液的扩散系数Ds成反比。式中ωs是与容量因子k有关的系数。 气相色谱速率方程和液相色谱速率方程的形式基本一致,主要区别在液液色谱中纵向扩散项可忽略不计,影响柱效的主要因素是传质阻力项。 4. 流动相线速度对板高的影响 (1)LC和GC的H-u图 根据van Deemter公式作LC和GC的H-u图,LC和GC的H-u图十分相似,对应某速都有一个板高的极小值,这个极小值就是柱效点;LC板高极小值比GC的极小值小一个数量级以上,说明液相色谱的柱效比气相色谱高得多;LC的板高点相应流速比起GC的流速亦小一个数量级,说明对于LC,为了取得良好的柱效,流速不一定要很高。 (2) 分子扩散项和传质阻力项对板高的贡献 较低线速时,分子扩散项起主要作用;较高 线速时,传质阻力项起主要作用;其中流动相传质阻力项对板高的贡献几乎是一个定值。在高线速度时,固定相传质阻力项成为影响板高的主要因素,随着速度增高,板高值越来越大,柱效急剧下降。 5. 固定相粒度大小对板高的影响 粒度越细,板高越小,并且受线速度影响亦小。 这就是为什么在HPLC中采用细颗粒作固定相的根据。当然,固定相颗粒愈细,柱流速愈慢。只有采取高压技术,流动相流速才能符合实验要求。
色谱作用有哪些?
色谱试剂用途广泛,凡用到高压液相色谱仪器的单位,如工厂、学校、医院、质检部门、商检部门、环保部门、石化行业、业部门每天都用到大量的色谱淋洗剂。
色谱法的应用可以根据目的分为制备谱和分析谱两大类。 制备谱的目的是分离混合物,获得一定数量的纯净组分,这包括对有机合成产物的纯化、天然产物的分离纯化以及去离子水的制备等。相对于色谱法出现之前的纯化分离技术如重结晶,色谱法能够在一步作之内完成对混合物的分离,但是色谱法分离纯化的产量有限,只适合于实验室应用。 分析谱的目的是定量或者定性测定混合物中各组分的性质和含量。定性的分析谱有薄层色谱、纸色谱等,定量的分析谱有气相色谱、高效液相色谱等。色谱法应用于分析领域使得分离和测定的过程合二为一,降低了混合物分析的难度缩短了分析的周期,是目前比较主流的分析方法。在中华典中,共有超过约600种化学合成和超过约400种中的质量控制应用了高效液相色谱的方法。
色谱法的两项是什么?
(一)按两相状态:气相色谱法、气固色谱法、气液色谱法、液相色谱法、液固色谱法、液液色谱法。
(二)按固定相的几何形式:柱色谱法、纸色谱法、 薄层色谱法。
(三)按分离原理:吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法、尺寸排阻色谱法、亲和色谱法。
色谱定性的方法有哪些?
色谱定性方法有以几种,
1,保留时间定性是最原始的定性方法。
2.调整保留时间定性,是扣余非溶时间定性的方法,它比保留时间更加准确。由于保留时间和调整保留时间受气体流量和温度的影响,对峰比较多的组分定性困难,引出的保留指数定性,色质定性等。
色谱定性的依据,是在同一特定的色谱条件下,不同的物质在固定相上保留的能力不一样,因此它们的保留时间不同,也就是说他们的出峰时间不同,可以通过保留时间来进行定性,目前各种色谱定性方法都是基于保留值的。但是不同物质在同一色谱条件下,可能具有相似或相同的保留值。在精度高的色谱上,保留时间可以到零点几秒。从色谱图中可以得到定性的信息有:被测样品中有几种物质,它们大概的比例,从出峰的出峰顺度可以粗略的判断化合物的极性。
色谱定性分析的方法:包括纯物质对照法、利用保留值经验规律定性、利用其它方法定性这三种。